nbio208

lox-PKAchu

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PKAのキナーゼ活性をモニターするFRETバイオセンサー（細胞質局在型）にlox-tdKeimaを付加したプローブを発現させたトランスジェニックマウスである。PKA (protein kinase A, プロテインキナーゼA, またはサイクリックAMP依存性プロテインキナーゼ) は、ホルモンや生理活性物質の刺激により細胞内濃度が上昇したサイクリックAMPによって活性化される蛋白質リン酸化酵素であり、ホルモンなどの作用を伝達する。本マウスはCAGプロモータ下にほぼすべての組織でKeima蛍光タンパク質を発現する。組織特異的Cre発現マウスと交配することにより、組織特異的にKeima蛍光タンパク質からFRETバイオセンサーへと発現をスイッチすることができる。このマウスを二光子顕微鏡による生体イメージング観察することにより、胎児および成体のさまざまな組織におけるPKAのキナーゼ活性を時間的、空間的に測定することが可能である。様々な組織の初代培養細胞にても十分な発現が見られることから、生きた動物でのシグナル伝達系の解析のみならず、シグナル分子をターゲットとした薬力学的解析など、創薬への応用も期待される。発生段階でもほぼすべての細胞にバイオセンサーの発現が観察できる。 なお、一般的にFRETバイオセンサーは固定標本には用いることができない。

注：FRET(F?rster (or fluorescence) resonance energy transfer, 蛍光共鳴エネルギー移動)